大鼠心肌細胞H9C2是原始克隆細胞系的亞克隆，該細胞系由Kimes.和Brandt.從胚胎BD1X大鼠心臟組織獲得，并顯示出骨骼肌的許多特性。這個細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%，融合發(fā)生得很快。

　　

　　大鼠心肌細胞H9C2用于大鼠心肌細胞Hsp60/Hsp10的表達及抗熱應激損傷機理研究。

　　

　　通過對大鼠和離體培養(yǎng)的鼠源H9C2心肌細胞進行不同時間的熱應激處理,擬動態(tài)觀察和了解熱應激大鼠心肌細胞中Hsp60及其相應mRNA的轉錄和表達水平,以及Hsp60在體內(nèi)、外心肌細胞中的定位和分布等特點,研究熱應激過程中Hsp60的變化規(guī)律與大鼠心肌細胞熱應激損傷的相關性,探討Hsp60的組織細胞保護機制。

　　

　　為研究熱應激對體內(nèi)、外大鼠心肌細胞造成的應激性損傷及其程度,本試驗通過病理學檢測,觀察了受試大鼠心肌細胞和鼠源H9C2心肌細胞在遭受不同時間的熱應激處理后所呈現(xiàn)的應激性損傷變化。試驗結果顯示,熱應激處理初期,受試大鼠的呼吸頻率加快,被毛粗亂,煩躁不安,隨后大量出汗,俯臥少動。待熱應激處理至60min時出現(xiàn)大鼠的熱應激猝死,熱應激處理100min后,50%的受試大鼠猝死,熱應激處理2h內(nèi),100%的受試大鼠發(fā)生猝死;離體培養(yǎng)的H9C2心肌細胞在遭受熱應激的時間達60min時,細胞的活力和存活率開始顯著下降,熱應激處理240min后,約50%的H9C2大鼠心肌細胞死亡。

　　

　　說明離體培養(yǎng)的大鼠心肌細胞H9C2對熱應激的耐受時間更長;組織病理學結果顯示,熱應激處理20min后大鼠心肌細胞腫脹,心肌細胞質(zhì)渾濁,呈現(xiàn)明顯的顆粒變性。熱應激處理40min組大鼠的部分心肌細胞發(fā)生明顯的顆粒變性,細胞質(zhì)嗜酸性顯著增強。熱應激處理至100min組大鼠的心肌細胞斷裂較為明顯,心肌細胞核濃縮;細胞病理學結果顯示,20min熱應激處理組H9C2大鼠心肌細胞的體積腫大,形態(tài)變圓,細胞漿內(nèi)出現(xiàn)少量的紅染顆粒。40min熱應激處理組心肌細胞的胞漿內(nèi)出現(xiàn)較多的紅染顆粒。60min熱應激處理組H9C2大鼠心肌細胞出現(xiàn)脫落現(xiàn)象,細胞形態(tài)變圓且細胞邊緣出現(xiàn)不規(guī)則的突起,細胞體積顯著變大,胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量密集分布的紅染顆粒。

　　

　　熱應激導致的大鼠心肌細胞和離體培養(yǎng)鼠源大鼠心肌細胞H9C2的病理學變化均隨著熱應激處理時間的延長而加劇,但離體培養(yǎng)心肌細胞表現(xiàn)出更強的熱應激耐受性。為研究動物心肌細胞內(nèi)Hsp60表達變化在熱應激性心肌損傷以及動物猝死中的作用,本試驗通過熱應激過程中體內(nèi)、外大鼠心肌細胞中Hsp60及其相應mRNA的表達水平和在細胞的定位等進行了動態(tài)觀察,并對Hsp60表達改變與心肌的熱應激損傷的相關性進行了比較分析。